发酵液检测

一、核心检测项目

‌理化参数‌

‌pH值‌：反映微生物代谢活性，通过pH计实时监测（精度±0.01）。

‌生物量‌：光密度法（OD600）或细胞干重法测定菌体浓度。

‌底物浓度‌：残留底物（如葡萄糖）的定量分析，指导发酵过程优化。

‌代谢产物与杂质‌

‌目标产物‌：乙醇、乳酸等通过HPLC或酶法检测（误差≤5%）。

‌副产物与污染物‌：气相色谱法检测挥发性副产物（如乙酸），微生物培养法筛查杂菌污染。

二、检测方法与流程

操作步骤：

1. 校准pH计：使用标准缓冲液（pH 4.0/7.0/10.0）；

2. 样品预处理：离心去除菌体后取上清液；

3. 直接浸入探头读数，避免温度波动＞2℃。

光密度法测生物量‌

取1mL发酵液以无菌生理盐水稀释，分光光度计600nm波长测定（稀释倍数需确保OD值在0.1-0.5区间）。

‌代谢产物分析‌

‌HPLC法‌：C18色谱柱，流动相为0.005M硫酸（流速0.6mL/min），RI检测器定量。

三、注意事项

‌样品保存‌：

发酵液需立即检测或低温（4℃）保存（≤24h），避免微生物代谢干扰数据。

‌校准与质控‌：

分光光度计每日需空白校准，HPLC系统运行前用标准品验证线性范围（R²≥0.995）。

‌动态监测‌：

工业发酵建议每2h采集一次数据，同步记录温度、溶氧等工艺参数6。

（注：具体检测方案需结合发酵类型调整，如厌氧发酵需额外监测氢气或甲烷气体产量）